头牛皮癣遺传

做动物实验模型，想让基因过表达和沉默，是构建腺...

1、构建基因过表达载体是基因工程的核心，旨在将基因导入载体，确保其在受体细胞中稳定表达。常见的载体有细菌质粒、噬菌体及动植物病毒，其中细菌质粒因自身具备自我复制能力，成为最常用的选择。在准备SUN基因片段与载体结合时，使用VectorNTI工具确定酶处理策略。

2、在大肠杆菌，酵母和哺乳动物细胞中，构建的外源质粒直接导入细胞即可，这个过程称为转化或转染。对于昆虫表达系统，构建的质粒还需要先转座成为杆状病毒基因组才能用于转染。 基因过表达的应用：大肠杆菌表达系统，酵母表达系统，昆虫表达系统，哺乳动物细胞表达系统和体外翻译系统（无细胞体系）。

3、基因过表达的步骤是：1，构建克隆。将目的基因连接在特定的载体上，载体种类依据表达系统差异而不同。在载体上一般含有增强基因转录的promoter，不同系统中采用的promoter完全不同 2，将克隆导入表达细胞中。在大肠杆菌，酵母和哺乳动物细胞中，构建的外源质粒直接导入细胞即可，这个过程称为转化或转染。